技术资料 冻干菌种复苏操作方法

技术资料 冻干菌种复苏操作方法

1、检查产品的有效期，按照说明书准备好菌株复苏所需要的75%消毒酒精、废液缸、接种 环、镊子、打火机、酒精灯与培养基平板、斜面。

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2、用75%酒精对产品表面进行消毒。待干，按照瓶蓝盖上箭头方向剥开密封包装。

3、调校移液枪（或准备无菌吸管）。吸取配套的复苏液体约300-500uL。

4、将复苏液直接添加到冻干菌粉瓶中，用移液枪或吸管反复吸打混匀（注意：吸打时枪头不 能离开液面，避免产生气溶胶）。

5、烧环，挑取满一环菌液，划线至试管斜面中（M1，第一代菌株可以用于保存）。

6、烧环，挑取满一环菌液，划线至平板琼脂中（M1，第一代菌株用于工作实验）。 （备注：同时吸取少量的菌悬液，约50-100uL直接滴加到平板中央，以防划线平板、斜面无法成功复苏）。

7、用油性笔写上菌种信息、日期、代数等信息，按说明要求放置于适应温度的培养箱中培养。

8、将剩余的菌悬液和接种平板、斜面同时培养，如成功复苏，平板和斜面均生长良好。

9、注意事项 （1）请开冻干之前检查产品的完整性，是否仍在保质期内。 （2）操作之前必须先详细阅读使用说明书，并准备好需要的培养基和培养条件。 （3）冻干菌粉和配套肉汤均为一次性使用产品，开启后不能再次保存。 （4）如培养之后平板和斜面均无菌生长，请将同时培养菌悬液再次划线新的平板和斜面。 （5）使用之后的剩余产品必须经过生物无害化处理（121℃，灭菌15 分钟灭活。）

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